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| MARTINS, Cátia Liane Teixeira Evaluation and validation of retrotransposons-based kits for DNA analysis of degraded biological evidence and rootless hair [Documento electrónico] / Cátia Liane Teixeira Martins.- Porto : [s.n.], 2016.- 1 CD-ROM ; 12 cm Dissertação de Mestrado apresentada à Faculdade de Ciências da Universidade do Porto, tendo como orientadores Maria Manuela Martins Oliveira, Luísa Azevedo, Paulo Miguel Ferreira. Ficheiro de 2,15 MB em formato PDF (83 p.). Resumo inserto na publicação. ANÁLISE DE CABELO, ANÁLISE DE VESTÍGIOS, GENÉTICA, ADN, LABORATÓRIO DE POLÍCIA, ANÁLISE LABORATORIAL, LPC, POLÍCIA JUDICIÁRIA, TESE, PORTUGAL Os investigadores de cenas de crime enviam, frequentemente, para os Laboratórios forenses amostras biológicas limitadas em quantidade e qualidade do ADN, devido a condições ambientais, tempo e condições de preservação. Para facilitar a análise destas amostras, a InnoGenomics Technologies desenvolveu novos kits para quantificação e amplificação de ADN (InnoQuant HY and InnoTyper 21) baseados em retrotransposões. O objetivo do presente trabalho foi validar internamente os kits InnoQuant HY e InnoTyper 21, sob as condições de trabalho do Laboratório de Polícia Científica da Polícia Judiciária (LPC-PJ) e avaliar a sua capacidade para produzir resultados em amostras recolhidas em cenas de crime reais. Para a validação interna foram realizados testes de sensibilidade, repetibilidade e reprodutibilidade. Adicionalmente, foi também realizado um estudo de concordância entre os kits atualmente em uso no LPC-PJ e estes novos kits. Para os testes anteriormente descritos foram selecionadas 132 amostras de extratos do LPC-PJ (principalmente cabelo com folículo, mas também sangue, vestígios de contacto e dentes). Finalmente, foi analisado um conjunto de 40 amostras de cabelo sem raiz para observar a capacidade dos kits InnoQuant HY e InnoTyper 21 para produzir resultados nestas amostras consideradas difíceis do ponto de vista forense. Os resultados obtidos para os testes de sensibilidade, repetibilidade e reprodutibilidade permitiram validar internamente os kits InnoQuant HY and InnoTyper 21. Das 132 amostras testadas, os resultados demonstraram que o kit InnoQuant HY foi capaz de produzir resultados de quantificação em cerca de 28,8 % mais das amostras analisadas do que o kit the Quantifiler Duo, indicando o novo kit é mais efetivo no tratamento de amostras difíceis. No que respeita ao kit InnoTyper 21, os resultados demonstraram que no conjunto de amostras selecionadas e sob as condições de trabalho utilizadas neste estudo, as diferenças observadas entre ambos os kits (InnoTyper 21 e GlobalFiler) não foram significativas. Contudo, foi comprovada a utilidade do kit InnoTyper 21, especialmente devido a amplificação de um grande número de perfis genéticos completos. Os resultados obtidos para o conjunto de 40 amostras de cabelos sem raiz permitiram confirmar que ambos os kits InnoQuant HY e InnoTyper 21 representam boas alternativas para análise de amostras difíceis. |